10.00 蛋白相关问题求教

项目进度

  • 发布需求

    2017-09-05

  • 威客交稿

    2017-09-25

  • 雇主选稿

    2017-09-30

  • 公示期

    2017-09-30

  • 5

    评价

需求描述

请教:有什么办法可以单独分离培养上清中的分泌型蛋白,而不含或尽量少含外泌体的?

另外一个问题,用ELISA检测培养上清中的某个蛋白成分,测出来的可能会是外泌体中的蛋白么,还是只是测到分泌的游离可溶性蛋白,因为没有裂解外泌体的膜。

谢谢各位。


精准对接
二等奖

投稿人: gongmin00

从你的描述来看,你并没有裂解细胞?那就很容易啊,一般目标蛋白会插入标签比如his-tag, 你可以用相对应的 affinity column 来纯化蛋白。如果你没有插入标签蛋白的话,你需要找出你的分泌蛋白和外泌体中蛋白的PI值,然后调整pH 到目标蛋白的PI值就可以把二者简单分离。


ELISA的话要看你用的抗体是针对哪个蛋白啊,如果对分泌蛋白有特异性的话就是测分泌蛋白的啊。不会测到其他的。

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