10.00 蛋白上样量指的是每个孔的上样蛋白浓度吗?

项目进度

  • 发布需求

    2018-04-15

  • 2

    威客交稿

    2018-05-05

    距离投稿结束时间剩余

  • 3

    雇主选稿

  • 4

    公示期

  • 5

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需求描述

请问大神,蛋白上样量指的是每个孔的上样蛋白浓度吗?

还有一个问题,在电泳恒压时,为什么跑着跑着变成了恒流,而恒流转膜时,电压却一直上不去,设置的120mA恒流,电压一直在34V左右,这是为什么呀,是因为缓冲液的问题吗,每次都是新配的,是买的10x的缓冲液,直接稀释后用的。


精准对接

投稿人: 夏布忍冬

附件:

你好,请问你询问的是western lot实验中的蛋白上样量吗?一般指的是每个孔的样品的蛋白总量。例如,你测得的样品蛋白浓度为2μg/μl,如果要上总蛋白30μg,则需要你的样品15μl。WB实验中要求每个孔的上样量一致,所以如果单个蛋白样品浓度不一致的话,所上的样品体积就不一样,因此需要用1X的上样buffer 补齐上样总量。

比如有三个样品,总上样量为30μg,计算上样体积(例1):

上样之前,把样品和1x buffer在EP管中先混合均匀,然后统一点样。

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