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  • 问题如下:1.提取总RNA后是不是需要加特异的引物逆转录成U6的cDNA,然后做QPCR的时候需要加U6的上下游引物?2.同理,提取总RNA后是不是需要加特异的引物逆转录成miRNA的cDNA,然后做QPCR的时候需要加miRNA的上下游引物?3.这样的话
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  • sh细胞刚买来时长得挺好,后来冻存了几管后就突然长得不好 长的也慢了。后来将培养基血清浓度增加到20%,细胞状态变好,但没有降低血清浓度 一直用20%浓度血清的培养基培养了2天,昨天发现其中一瓶sh细胞变成了长梭形。不
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  • 设计的引物,blast后是只有一条黑线的说明特异性好吗?有的引物blast后出现很多连线,是不是就不建议用,需要重新设计
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  • 最近投了篇case report,关于一个疾病的新发现基因突变的,下面是评审专家的问题,请大家帮忙分析一下是什么意思,我对这些东西一窍不通。谢谢各位前辈。There are slightly more updated algorithms and databases that the authors could choose to u
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  • 今日做免疫荧光,发现用santa一抗做的出现了异常的高背景,同时用其他抗体做出来的效果都挺好,不加一抗的阴性对照效果也挺好,估计是一抗的问题,请问这一抗到底是出了什么问题(以前做出来过)???一抗就是1:50稀释
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  • 最近打算做人血microRNA的实验,查了很多文献,在全血、血清、血浆中提取的都有,所以想问一下这三种物质中存在microRNA是相同的吗?由于经费问题,不能做高通量测序,只能看文献查找指标,不是很清楚这三种物质中的区别。
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  • lncRNA H19引物序列
  • 湖南省长沙市天心区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 64人参与 | 2人投稿
  •   9天后投稿截止
  • 许多文献中lncRNA H19引物序列用Primer-Blast比对后结果显示Homo sapiens H19 opposite tumor suppressor (HOTS), mRNA,请问这是H19吗?能用这对引物做H19的荧光定量PCR吗?十分感谢
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  • 最近做载体构建,菌液PCR有目的条带,但酶切和质粒PCR都没条带,做了几次,结果都是这样,请问各位大神,载体构建过程有哪些需要特别注意的呀?还有就是那个shRNA 也是,转化后不长菌,求各位大神指点!万分感谢!
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  • RACE实验设计引物
  • 广东省广州市海珠区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 54人参与 | 2人投稿
  •   6天后投稿截止
  • 最近小女子一直在做RACE实验,设计了好几条引物,都没有出来条带,这到底什么情况尼?是需要什么秘诀吗?
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  • 我想知道,如何根据DNA和RNA的AUCGT计算他们的大小,是以μm为单位的大小?公式是什么?
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  • 文献求助
  • 天津市塘沽区三槐路街道
  • 2.00
  • 诚意金悬赏
  • 71人参与 | 1人投稿
  •   已结束
  • 有大神做过人外周血全血miRNA的提取及后续PCR实验的吗?目前课题实验遇到瓶颈,求助大神!!!是否miRNA的PCR验证在全血做不出?必须要用血浆或者血清?目前血浆、血清也有部分样本。。。。有大神指条明路吗?
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  • 如何预测转录因子
  • 河南省郑州市上街区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 72人参与 | 2人投稿
  •   4天后投稿截止
  • 深夜求助,请问目前已知某个miRNA,及作用的某个靶基因,如何预测通过miR作用于靶基因的转录因子?在哪个网站可查询?还是用哪种实验方法?谢谢
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  • 最近在做关于血小板RNA的提取,但是一直提不出来,纯度和浓度都不好。思考了许久,提出了以下问题:1.血小板的纯化,看了好多文献,有用梯度密度离心的,有用磁珠去除白细胞的,一直不确定哪种方法合适。不用磁珠难道就
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  • 最近我要做microRNA测序,公司建议同时做mRNA的测序。可是看到好多资料说动物的miRNA很大一部分都影响的是转录后翻译,那么测mRNA是不是就没有什么意义呢?也就是说后续试验的验证,用定量检测靶基因mRNA也是没意义的吗?
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  • 关于CMV启动子,发现有589BP和720多的,现在打算做感染性克隆,不知道具体选哪个,这个CMV启动子是怎么确定下来的?有做过的能指教一下吗
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  • 我想要在如图的载体中插入一段目的基因,这段目的基因含有启动子,我插入的方向是从EcoRⅠ到KpnⅠ,这属于反向插入吗?对基因表达有什么影响吗?
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  • 如果的我的样品的DNA是混合DNA我可以通过PCR-连接T载体-挑单克隆的方法,来进行测序,得到不同的突变后的序列吗
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  • 我制同一批蛋白样品,跑了两次蛋白胶,结果考马斯染色后结果很奇怪,求高人指点迷津这是我第一次跑的结果这是我第二次跑的结果两次上样的都是同一批制的样,根据其他人做的,应该是第二次的正确,但是第一次到底是哪
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  • 我想构建一个过表达人源受体的模型和一个敲除模型。敲除采用的是内源性过表达该受体的细胞进行crispr/cas9。原本过表达是想构建载体转到293T上,但是后来老师跟我说这个受体在293T上不好表达。请问我能用内源性高表达的细胞
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