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  • MSP疑难求助
  • 天津市和平区体育馆街道
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  • 51人参与 | 0人投稿
  •   18天后投稿截止
  • 为什么本人在做甲基化PCR时,在摸索条件的时候,其中总有一个条件结果特别好,但是当我用这个条件去单独做MSP的时候,结果就不尽人意了。我为了消除引物二聚体的影响,在其中加入DMSO,做了一个浓度梯度,0.2,0.4,0.6ul,其
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  • 标准品的稀释问题
  • 广东省广州市越秀区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 41人参与 | 0人投稿
  •   18天后投稿截止
  • 我用高浓度的质粒稀释了4个不同浓度的标准品,分别是5E8,5E7,5E6,5E5,PCR上机结果,ct值在20到30之间,然后进行了分装,40ul一管,分装好放在-20℃保存。第二天再跑PCR,结果每个浓度的ct值差不多都大了1,也就是在21到31之间。我
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  • 本人一直在做某个lncRNA的PCR扩增(这个lncRNA是新预测的,根据RNA-Seq回来的序列进行引物设计,引物Blast后不扩增这个物种任何mRNA序列),片段大小为523bp,设计引物后提取组织RNA反转录为cDNA进行扩增,(F:CAGACCTCCTAACCCCACATCAA R:CCCCACTTCT
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  • 粪便dna提取求助
  • 上海市松江区上海松江科技园区
  • 10.00
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  • 251人参与 | 1人投稿
  •   15天后投稿截止
  • 本人最近想做人肠道菌群的研究,收集了一些粪便标本,想自己提取dna然后送公司做测序,但是不知道用哪种试剂盒提取,有没有性价比高推荐的?感谢!!
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  • RNA电泳结果求解
  • 湖北省武汉市东西湖区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 256人参与 | 0人投稿
  •   15天后投稿截止
  • 我提过一次RNA,有降解,第二次跑电泳图跑成这样,是降解了么?只有两条带,是没有5s?80电压80电流16分钟,这样参数设置可以么,跑电泳前用RNa酶清除剂喷了喷,晾干才跑的电泳,电泳液什么都是新鲜的,求各位帮忙解答下
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  • 为什么筛选突变体时,用cas9做引物鉴定,结果阴性对照和所有的样本都有条带,而且大小和理论的不一样?以为是污染了,可是换过了试剂,还是有条带。有没有大神知道怎么回事儿,谢谢了
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  • 我的克隆步骤如下:一、目的基因的扩增共有三个目的基因,分别是sec6、sec9、sec2.首先设计好目的基因的扩增引物,并在引物上加上酶切位点(sacl和xbal),然后进行目的基因的扩增,发现扩增条带特异,故直接用前面两种酶进
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  • 请问一下大家,配置5*TBE所用的EDTA是要配成0.5M的溶液还是直接称取EDTA粉末来的好呢?昨天,我试着称18.61g用dd水加热溶解,稍冷却,还未等我调ph到8.0和定容到100ml,就会析出好多白色固体样的物体,求一个比较好的处理方式,谢
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  • 除了PCR,怎样检测染色质免疫共沉淀(CHIP)的效果?我研究的转录因子靶基因未知,除了PCR,怎样检测染色质免疫共沉淀(CHIP)的效果?求指导!
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  • 最近在了解趋化因子,老师让我对趋化因子及受体进行同源序列对比。我一开始用NCBI查找序列然后用DNAMAN进行多重序列对比得到同源树。这是我的理解,我把结果发给老师之后老师问我能否做同源序列比对。请问同源序列对比和
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  • circRNA qRT PCR protocal
  • 湖南省长沙市天心区
  • 10.00
  • 诚意金悬赏
  • 615人参与 | 1人投稿
  •   5天后投稿截止
  • 求助:最近我想研究circRNA,目前我们实验室还没有人做这一块,这方面的实验技术欠缺,想请教circRNA提取的protocal,需要用到什么试剂,内参怎么选择,还有在提取中是否需要用RNAase R消化线性的RNA,引物如何设计,还有我如果上机
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  • 第一张是拖尾,第2张是什么鬼,求大神告知,拖尾可以通过什么手段来改善,第二张,先不管二聚体,加样孔之上怎么会这么亮,难道是我的电泳缓冲液0.5*TBE使用次数太多了吗,还是这不是主要的原因呢?谢谢
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  • 哪位大神帮我看一下我跑的电泳条带问什么会这个样子最右边的是marker,中间有明显条带的是内参,其它那些条带都是我测的一个miRNA,这个是为什么,是我的引物的事吗
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  • 最近一直在尝试用消化法培养肉鸡腔静脉内皮细胞,但是消化完之后,第二天观察细胞形态,贴壁的细胞很少,而且孔底有雾状的悬浮物,应该是死掉的大量细胞。求各位大神指点迷津我是将组织切碎之后,加入等量胰酶和二型
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  • 我想请教大家两个问题。1.运用冰冻切片机动物取材必须得用灌注法先固定,然后取材完了以后用同一种固定液固定吗?可以直接取材以后用4%的多聚甲醛固定吗?省去灌注的步骤(我要取的是心肌组织)2.用4%多聚甲醛固定一般时
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  • 请教:WB跑P62,CST的一抗,如何去除杂带? 最近一直在跑WB,P62蛋白,转膜100V,60min;血清封闭,2h;一抗用的是CST,浓度1:1000,4℃过夜;二抗1:5000,1h;跑出来后紧贴在P62蛋白下面有很明显的杂带,有哪位大神跑过P62,该如何去除
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  • 在看RACE相关的文章,大致的原理了解了一下,大概是先3’RACE,再5'RACE,最后通过这两个存在重复片段的产物来得到全长序列。那么问题来了,为什么要这么麻烦呢?直接在逆转录的时候给5'端加一个poly(C),利用3’端的poly(A)和5’
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