结合荧光淬灭减轻模式、焦点追踪与1000万像素6通道成像的细胞实验方案
| 应用指南概要:活细胞延时成像与蛋白、细胞共定位分析对显微镜的信号采集灵敏度、激发光控制及焦面稳定性有着较高要求。基恩士(KEYENCE)BZ-X1000一体化荧光显微成像系统(可搭配BZ-XLC1激光共聚焦单元)通过荧光淬灭减轻模式、焦点追踪位置校正以及1000万像素6通道多色成像功能,为活细胞动态记录与多重荧光分析提供支持。 |
一、 活细胞延时成像与多色标记的常见问题
在研究细胞迁移、增殖及胞内信号变化时,活细胞延时成像需要长时间连续记录样本动态。但在实际拍摄中,如果为了看清微弱的荧光信号而增加照射时间,长时间的激发光照射容易引起光漂白,导致拍着拍着荧光变暗,甚至产生光毒性,使细胞状态变差、影响实验结果。
同时,在多通道荧光共定位实验中,荧光标记效率低或非特异性染色容易造成信号弱、背景高以及不同通道串色;而长时间拍摄过程中的焦平面偏移或样本位置微移,也容易导致局部失焦或目标细胞移出视野。
二、 减轻光漂白与维持焦面稳定:活细胞动态追踪方案
针对活细胞长时程观察的实验要求,基恩士BZ-X1000在激发光控制与自动对焦追踪方面配置了专用功能:
1. 荧光淬灭减轻模式:系统配备荧光淬灭减轻模式,在实验人员获取预览图像后及时遮蔽激发光,减少非采集期间不必要的持续照射。这一设计能够有效降低激发光对样本的累积照射量,减缓荧光信号衰减并降低光毒性对细胞活性的影响。
2. 焦点追踪与位置校正功能:在长时间的延时拍摄过程中,系统的焦点追踪、延时拍摄及位置校正功能可以持续调整焦点并校准视野位置,降低长时间采集中的失焦与目标丢失风险,适用于长时间动态分析和记录细胞迁移、形态及荧光变化。

三、 1000万像素6通道成像与共聚焦扩展
为了在较低曝光条件下依然看清细微结构,BZ-X1000搭载了1000万像素黑白CMOS相机,相对比于BZ系列前代设备分辨率提升至约3.5倍,能够高效采集微弱的荧光信号,避免因单纯延长曝光时间而放大背景噪点。
此外,系统支持6通道多色荧光成像,并具备实时叠加功能。实验人员可以直接观察多通道荧光的空间分布,有助于开展蛋白、细胞共定位及多重荧光分析。当观察三维培养细胞样本或较厚细胞层时,既可以利用LED光源与电气投影元件进行光学切片和3D分析,也可以搭配BZ-XLC1激光共聚焦单元,在不重新调整视野和焦点的情况下一键切换至共聚焦成像。无需独立暗室的一体化设计与远程控制功能,也方便将设备直接部署在细胞实验室中使用。

四、 细胞生物学实验场景与系统功能匹配表
| 细胞实验研究方向 | 常见实验难点 | 系统核心功能支撑 |
| 活细胞迁移与形态追踪 | 长时间拍摄易引起光漂白、光毒性及失焦 | 荧光淬灭减轻模式(预览后遮蔽激发光)、焦点追踪、位置校正 |
| 微弱荧光信号采集 | 荧光标记效率低、信号弱,延长曝光易放大背景 | 1000万像素黑白CMOS相机(相对比于BZ系列前代设备分辨率提升约3.5倍),高效采集微弱信号 |
| 蛋白与细胞共定位分析 | 多通道串色、后期合成繁琐,影响细微结构观察 | 支持6通道多色荧光成像与实时叠加功能,直接观察多通道分布 |
| 三维培养样本结构观察 | 细胞层较厚导致焦平面外荧光叠加、边界模糊 | Z栈采集+3D分析,可搭配BZ-XLC1激光共聚焦单元一键切换 |
| 多孔培养板批量分析 | 逐孔寻找视野与反复调焦耗时长、暗室空间受限 | 高速自动导航扫描(相对比于BZ系列前代设备速度提升至5倍)、免暗室一体化设计与远程控制 |
编辑:李丽
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